TGuide Bacteria Genomic DNA Kit

A-1 Ubos nga konsentrasyon sa mga selyula o virus sa pagsugod nga sampol - Pagpalambo sa konsentrasyon sa mga selyula o mga virus.

A-2 Dili igo nga lysis sa mga sampol —Ang mga sampol wala pa masagol nga maayo sa buffer sa lysis. Gisugyot nga hingpit nga isagol sa pulse-vortexing sa 1-2 ka beses. —Dili igo nga cell lysis nga hinungdan sa pagkulang sa kalihokan sa proteinase K. —Dili igo nga cell lysis o pagkadaut sa protina tungod sa dili igo nga mainit nga oras sa pagkaligo. Gisugyot nga putlon ang tisyu sa gagmay nga mga piraso ug ipahaba ang oras sa pagkaligo aron makuha ang tanan nga nahabilin sa lysate.

A-3 Dili igo nga adsorption sa DNA. —Walay ethanol o low-porsyento imbis nga 100% ethanol ang nadugang sa wala pa ibalhin ang lysate sa kolum nga spin.

A-4 Ang pH nga kantidad sa elution buffer labihan ka mubu. —I-adjust ang pH sa taliwala sa 8.0-8.3.

Ang nahabilin nga etanol sa mga eluent.

—Adunay nahabilin nga buffer nga paghugas sa PW sa eluent. Ang etanol mahimong tangtangon pinaagi sa pag-centrifuging sa haligi sa pagtuyok sa 3-5 min, ug pagkahuman ibutang sa temperatura sa kuwarto o 50 ℃ incubator alang sa 1-2 min.

A-1 Ang sampol dili lab-as. —Kuha usa ka positibo nga sampol nga DNA ingon nga kontrol aron mahibal-an kung ang DNA sa sample nakadaot.

A-2 Dili maayo nga pauna nga pagtambal. —Nahinungdan sa sobra nga paggaling sa likido nga nitroheno, pagbawi sa umog, o sobra kadaghan nga sampol.

Ang mga pretreatment kinahanglan magkalainlain alang sa lainlaing mga sample. Alang sa mga sampol sa tanum, siguruha nga hingpit nga magagaling ang likido nga nitroheno. Alang sa mga sampol sa hayop, homogenate o hingpit nga paggaling sa likido nga nitroheno. Alang sa mga sampol nga adunay mga dingding sa cell nga lisud mabuak, sama sa bakterya nga G + ug lebadura, gisugyot nga gamiton ang lysozyme, lyticase o mekanikal nga pamaagi aron mabuak ang mga dingding sa cell.

4992201/4992202 Ang Plant Genomic DNA Kit nagsagop usa ka pamaagi nga nakabase sa haligi nga nanginahanglan nga chloroform alang sa pagkuha. Ilabi na nga kini nga angay alang sa lainlaing mga sampol sa tanum, maingon man ang uga nga pulbos sa tanum. Ang Hi-DNAsecure Plant Kit nakabase usab sa kolum, apan wala kinahanglan ang pagkuha og phenol / chloroform, gihimo kini nga luwas ug dili makahilo. Kini angay alang sa mga tanum nga adunay taas nga polysaccharides ug sulud sa polyphenol. 4992709/4992710 Ang DNAquick Plant System nagsagop sa usa ka pamaagi nga nakabase sa likido. Ang pagkuha sa phenol / chloroform dili kinahanglan usab. Ang pamaagi sa pagputli yano ug dali nga wala’y kinutuban alang sa mga sampol nga kantidad sa pagsugod, mao nga ang mga tiggamit mahimo nga mag-ayo sa kantidad nga mabalhin pinasubay sa mga kinahanglanon sa eksperimento. Daghang gidak-on sa mga tipik sa gDNA mahimong makuha nga adunay taas nga ani.

Ang genomic DNA gikuha gikan sa lainlaing mga volume sa tibuuk dugo nga sampol sa tawo pinaagi sa TIANamp Blood DNA Kit. Ang mga sangputanan mao ang mosunud. Ang mga sangputanan gilista ingon nga pakisayran ra, ang tinuud nga mga sangputanan nga pagkuha gikuha sa mga kondisyon sa mga sampol.

Mahimo ang pagpagawas sa dugo nga dugo sa dugo gamit ang mga reagent nga gihatag sa kini nga duha nga kit pinaagi sa pagbag-o ra sa protokol sa piho nga panudlo alang sa pagkuha sa dugo nga dugo sa dugo. Ang malumo nga kopya sa dugo nga nagkuha nga protokol sa pagkuha sa DNA mahimo nga igahatag sa paghangyo.

Suspinde ang lab-as nga sampol nga adunay 1 ml PBS, normal nga asin o TE buffer. Hingpit nga homogenize ang sampol sa usa ka homogenizer ug kolektaha ang butnga sa ilawom sa usa ka tubo pinaagi sa centrifuging. Ilabay ang supernatant, ug ibalik ang pagpauswag sa 200 μl buffer GA. Ang mosunud nga pagputli sa DNA mahimo’g ipahiuyon sa panudlo.

Alang sa pagputli sa gDNA sa plasma, sampol sa serum ug likido sa lawas, girekomenda ang TIANamp Micro DNA Kit. Alang sa pagputli sa virus gDNA gikan sa mga sampol sa serum / plasma, girekomenda ang TIANamp Virus DNA / RNA Kit. Alang sa pagputli sa bakterya gDNA gikan sa mga sampol sa serum ug plasma, girekomenda ang TIANamp Bacteria DNA Kit (ang lysozyme kinahanglan iupod alang sa positibo nga kagaw). Alang sa mga sampol sa laway, girekomenda ang Hi-Swab DNA Kit ug TIANamp Bacteria DNA Kit.

Girekomenda ang DNAsecure Plant Kit o DNAquick Plant System alang sa pagkuha sa fungal genome. Alang sa pagkuha sa lebadura nga genome, girekomenda ang TIANamp Yeast DNA Kit (ang lyticase kinahanglan nga andam sa kaugalingon).